流式细胞技术是一种集电子计算机技术、激光技术、流体理论于一体的现代分析技术，能够对细胞或微球的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测。随着流式细胞分析技术与方法的日臻完善和应用范围的不断拓宽，几乎各型皮肤病研究都会涉及到该项技术，本文对流式细胞术在皮肤病学中的应用进行综述。

1 在微生物感染性皮肤病中的应用

T细胞表面有许多重要的协同刺激分子，参与T细胞的活化、增殖及发挥效应功能。B7/CD28就是一对重要的协同刺激分子，是特异性细胞免疫应答所必需的信号，在启动和调控免疫应答中起到关键作用。研究证明，在疱疹病毒感染、潜伏或复发过程中，B7/CD28协同刺激信号都发挥着重要作用[1-3]，Morrow等[4]也发现，VZV能感染成熟的人类树突状细胞，并特异性的下调细胞表面免疫分子CD80、CD86等的表达，同时减弱其对T细胞的刺激作用。为了解协同刺激分子在潜伏疱疹病毒引起机体再感染方面的信使及参与作用的机制，可以利用流式细胞技术对带状疱疹患者外周血淋巴细胞表面CD80、CD86及其受体CD28的表达水平进行了检测，并结合临床资料进行相关性分析。

2 在荨麻疹研究中的应用

流式细胞仪也逐渐用于荨麻疹免疫机制的研究，荨麻疹是一种常见的临床表现为剧烈瘙痒及风团样皮损的皮肤病。李润祥[5]等利用流式细胞仪对急性荨麻疹和慢性荨麻疹患者外周血T细胞亚群进行检测，并结合抗组胺治疗效果进行分析，以探讨荨麻疹患者T细胞亚群对抗组胺治疗的影响。另外也可利用流式细胞仪检测慢性特发性荨麻疹患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量，了解调节性T细胞在慢性特发性荨麻疹发病中的作用。

3 在银屑病研究中的应用

银屑病是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤，目前确切病因尚不清楚，其发病机制与免疫介导关系较密切，也是近年来研究的热点，而流式细胞术在研究中起着重要作用。例如研究人员采用流式细胞仪分析群体细胞亚细胞群DNA含量的荧光强度体现的细胞凋亡和细胞增殖周期, 进一步研究银屑病不同阶段皮损表皮角朊细胞凋亡和细胞周期变化[6]。另外还可利用流式细胞术对银屑病患者血小板活化分子CD62P 及CD63 的表达进行定量研究，以了解血小板活化与银屑病发病的关系。

在银屑病的发病机制中，T 细胞向皮肤炎症部位定向归巢是其中的重要环节。T 细胞表面的归巢受体主要有淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)和极迟抗原-4(VLA-4)，有研究人员采用CD3 标记外周血单核细胞中的T细胞，CD49d标记VLA-4，通过流式细胞仪检测银屑病患者外周血T细胞VLA-4的表达，确定VLA-4在银屑病的发病中可能起着不可忽视的作用[7]。

4 在血管性及出血性疾病研究中的应用

常见的血管性及出血性疾病如过敏性紫癜等在研究中也逐渐利用到流式细胞技术，如采用流式细胞仪检测过敏性紫癜患儿外周血T细胞亚群的数量，动态观察患者急性期和缓解期前后T细胞亚群的变化情况，有助于揭示免疫指标的演变，为选择适当的治疗方案提供依据[8]。

5 在湿疹研究中的应用

流式细胞术也被用于慢性湿疹发病机制的研究中，例如CD4+CD25+Treg细胞来源于胸腺，大约占正常人外周血CD4+T细胞数的5%~10%，其特征性的分子标记是Foxp3[9]。Roncador等[10]用PE荧光标记的抗人Foxp3单抗与胞内Foxp3结合，通过流式细胞仪从单细胞水平上研究Treg细胞，检测慢性湿疹患者和正常人外周血CD4+CD25+T细胞数量及胞内转录因子Foxp3表达水平，了解湿疹患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)数量改变所致的细胞免疫抑制效应。另外例如CD19是B细胞表面的糖基化Ⅰ型跨膜蛋白，仅表达于正常造血系统的B细胞和生发中心的滤泡树突状细胞(FDC)，其在 B细胞系各分化阶段均有持续稳定表达，是最早发现的 B细胞系表面标志，在B细胞活化过程中消失，其表达高低代表B细胞水平。勒云霞[11]利用流式细胞仪检测病程不同的湿疹患者外周血CD19的表达，发现明显低于正常对照，表明湿疹患者的B细胞数量减少，体液免疫功能下降。

6 在系统性红斑狼疮研究中的应用

系统性红斑狼疮一种侵犯皮肤和多脏器的一种全身性自身免疫病，患者体内可查到多种自身抗体，体液免疫在发病机制中占主导地位。研究人员用流式细胞术测定SLE患者外周血中CD19+B细胞以及CD19+CD38+B细胞的比例，来了解外周血中B细胞的激活情况和亚型的分布变化。除了用于发病机制的研究，在治疗效果评估中也可以用到流式细胞技术。多项研究表明SLE患者外周血中T h17细胞升高, 且与皮肤、肾脏等器官损伤有关[12]。T h17/IL-17有望成为自身免疫性疾病治疗的新靶点。为体外观察异基因脂肪干细胞用于活动期SLE患者的治疗后，对Th17细胞数量及功能的影响，可以用流式细胞技术检测Th17细胞数量的变化。

随着流式细胞技术的不断发展，其在各研究领域的应用将越来越广泛。